Glicosilação de exossomas de células de carcinoma do ovário

O cancro de ovário é a causa principal de morte por cancros ginecológicos em muitos países ocidentais. Uma característica do fenótipo da célula tumoral consiste em alterações na glicosilação de glicoproteínas de superfície celular. Exossomas são vesículas secretadas por células humanas, incluindo células tumorais, e também são glicosilados, sendo detectados em fluidos biológicos o que lhes confere relevância em diagnóstico. Os exossomas têm composições proteica e lipídica características, no entanto, os resultados relativos a composição em glicoproteínas e glicosilação são escassos. Este trabalho fornece informação detalhada sobre a composição de exossomas de células de carcinoma do ovário SKOV3 em glicoproteínas e N-glicanos o que permitirá explorar a sua relevância na biologia dos exossomas e poderá ter impacto na área de diagnóstico.

Autores e Afiliações:

Cristina Escrevente¹, Nicolas Grammel², Sebastian Kandzia², Johannes Zeiser², Erin M. Tranfield³, Harald S. Conradt², Júlia Costa¹

^1.Laboratory of Glycobiology, Instituto de Tecnologia Química e Biológica, Universidade Nova de Lisboa, Oeiras, Portugal

^2.GlycoThera GmbH, Hannover, Germany

^3.Electron Microscopy Facility, Instituto Gulbenkian de Ciência, Oeiras, Portugal

Abstract:

Exosomes consist of vesicles that are secreted by several human cells, including tumor cells and neurons, and they are found in several biological fluids. Exosomes have characteristic protein and lipid composition, however, the results concerning glycoprotein composition and glycosylation are scarce. Here, protein glycosylation of exosomes from ovarian carcinoma SKOV3 cells has been studied by lectin blotting, NP-HPLC analysis of 2-aminobenzamide labeled glycans and mass spectrometry. An abundant sialoglycoprotein was found enriched in exosomes and it was identified by peptide mass fingerprinting and immunoblot as the galectin-3-binding protein (LGALS3BP). Exosomes were found to contain predominantly complex glycans of the di-, tri-, and tetraantennary type with or without proximal fucose and also high mannose glycans. Diantennary glycans containing bisecting N-acetylglucosamine were also detected. This work provides detailed information about glycoprotein and N-glycan composition of exosomes from ovarian cancer cells, furthermore it opens novel perspectives to further explore the functional role of glycans in the biology of exosomes.

Revista:

PLOS One

Link:

http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0078631