Associação Portuguesa de Investigação em Cancro
Uma nova ferramenta experimental para avaliar a atividade estaminal de células de cancro da mama in vivo
Uma nova ferramenta experimental para avaliar a atividade estaminal de células de cancro da mama in vivo
Estabelecemos um ensaio de diluições limitantes utilizando a membrana corioalantóide do embrião da galinha (CAM), usando um modelo metastático de cancro da mama, no qual já foi demonstrado um enriquecimento em células com potencial estaminal. Com este novo ensaio foi possível reproduzir os mesmos resultados encontrados no ratinho, o modelo animal standard para a avaliação do enriquecimento estaminal em cancro. De referir ainda que o modelo do embrião da galinha tem várias vantagens, nomeadamente o seu fácil manuseamento e acessibilidade, rápido crescimento, baixos custos e ausência de restrições éticas e reguladoras. Assim, o ensaio de diluição na CAM constitui uma nova e valiosa ferramenta para estudar a atividade estaminal de células de cancro in vivo.
Autores e Afiliações:
Marta Teixeira Pinto 1,2,† , Ana Sofia Ribeiro 1,2,† , Inês Conde 1,2, Rita Carvalho 1,2 and Joana Paredes 1,2,3
1 i3S—Institute of Investigation and Innovation in Health, 4200-135 Porto, Portugal
2 Ipatimup, Institute of Molecular Pathology and Immunology, University of Porto, 4200-135 Porto, Portugal
3 Faculty of Medicine, University of Porto, 4200-319 Porto, Portugal
† These authors contributed equally to this work.
Abstract:
The high plasticity of cancer stem-like cells (CSCs) allows them to differentiate and proliferate, specifically when xenotransplanted subcutaneously into immunocompromised mice. CSCs are highly tumorigenic, even when inoculated in small numbers. Thus, in vivo limiting dilution assays (LDA) in mice are the current gold standard method to evaluate CSC enrichment and activity. The chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) is a low cost, naturally immune-incompetent and reproducible model widely used to evaluate the spontaneous growth of human tumor cells. Here, we established a CAM-LDA assay able to rapidly reproduce tumor specificities—in particular, the ability of the small population of CSCs to form tumors. We used a panel of organotropic metastatic breast cancer cells, which show an enrichment in a stem cell gene signature, enhanced CD44+/CD24−/low cell surface expression and increased mammosphere-forming efficiency (MFE). The size of CAM-xenografted tumors correlate with the number of inoculated cancer cells, following mice xenograft.
Revista: International Journal Molecular Sciences